蜘蛛的天敌很多。蟾蜍，蛙，蚊，蜥蜴，蜈蚣和鸟类都会捕食蜘蛛。有的寄生蜂寄生于蜘蛛卵内，有的寄生蝇的幼虫在蜘蛛卵袋中发育，小头蚊虻昆虫几乎全部都是以幼虫的形式寄生到蜘蛛体内。这些不起眼的东西有时也会使蜘蛛致命。蜘蛛常用多种方法来御敌，如排出毒液，隐匿，伪袋，拟态，保护色，振动等等。当逃不掉时，自己的附肢被敌害夹持时，干脆切断自己的附肢一走了之，自断的步足在蜕皮时还会再生。