► isHCR原理示意图。

撰文 | 林 睿

责编 | 叶水送

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当需要测定样品中特定分子的含量时，通常会用到免疫化学分析方法，这是一种基于抗体和抗原间特异性结合的生物化学分析方法，在基础科研、医疗诊断、检验检疫和司法鉴定等领域中，属于最为常用的检测技术。

免疫化学分析的原理是利用带有信号分子的抗体特异性识别样品中的目标生物分子，通过测量信号强度对目标分子进行定量。在实际应用中，样品中目标分子的含量一般较低，为了提高检测灵敏度，免疫化学分析中通常会引入化学反应以增加信号强度。

传统信号放大方法主要基于酶促反应，将酶与抗体相偶联，利用酶的催化活性将无信号的底物不断转变为有信号的底物从而实现信号放大。由于酶促反应有非常强的信号放大能力，这种传统信号放大方法被广泛应用在免疫化学分析中。但是，随着近几年显微成像技术和样品制备技术的迅速发展，传统信号放大方法的缺点逐渐显露出来——主要包括降低成像分辨率、难于同时检测多个目标分子、不适用于大体积组织样品等。

► isHCR可实现不依赖抗体的多种蛋白同时检测，并适用于ExM和uDISCO样品制备技术

相比于传统信号放大方法，isHCR具有放大倍数高、模块化设计和可同时放大多个目标等优势，在病理诊断和检验检疫等领域有着广泛的应用前景。考虑到DNA分子可进行多种化学修饰，未来有更多潜在的化学反应可被整合入isHCR方法中。同时，isHCR还可与多种新型成像技术相结合，以实现对生物分子的高通量原位检测。

罗敏敏实验室博士生林睿为本文第一作者，其他作者包括罗敏敏实验室冯琦茹、王睿宇，邵峰实验室李鹏博士、周平博士、邵峰博士，汤楠实验室刘哲博士、汤楠博士，以及化学中心王志强、齐湘兵博士。

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Lin R et al. A hybridization-chain-reaction-based method for amplifying immunosignals. Nature Methods. 2018. doi:10.1038/nmeth.4611.

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